Karakterizacija autohtono prisutnih bakterija mliječne kiseline u tradicionalno proizvedenim hrvatskim svježim sirevima

diplomski rad

• Naslov (engleski): Characterization of autochthonous lactic acid bacteria from the traditionally produced Croatian fresh cheeses
• Autor: Ana Bogdan
• Mentor: Jasna Beganović (mentor)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prehrambeno-biotehnološki fakultet; (Zavod za biokemijsko inženjerstvo); (Laboratorij za tehnologiju antibiotika, enzima, probiotika i starter kultura); Zagreb
• Datum i država obrane: 2011-12-16, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOTEHNIČKE ZNANOSTI; Biotehnologija

Sažetak

Primjenom klasičnih mikrobioloških metoda, odabrane autohtone bakterije mliječne kiseline (BMK) su okarakterizirane kao gram-pozitivni, katalaza-negativni, nesporogeni koki ili štapići, koji uspješno spuštaju pH vrijednost, te sintetiziraju visoke koncentracije mliječne kiseline, nakon prekonoćnog uzgoja u MRS ili GM17 hranjivim podlogama. U konačnici je odabrano 20 različitih autohtonih BMK za ispitivanja probiotičkih svojstava. Odabrane BMK su identificirane sekvencioniranjem 16S rRNA gena te je ustanovljeno da pripadaju različitim rodovima BMK: Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Streptococcus i Enterococcus. Ispitana je osjetljivost autohtonih BMK na različite skupine antibiotika, kako bi se isključila mogućnost širenja antibiotičke rezistencije. Šesnaest od dvadeset izolata BMK je osjetljivo na sve ispitane antibiotike, dok se kod većine BMK antibiotik streptomicin nije pokazao učinkovit, što je vjerojatno posljedica osjetljivosti molekule streptomicina na niske pH vrijednosti koje su posljedica sinteze visokih koncentracija mliječne kiseline koja je primarni metabolit BMK. Ispitano je i preživljavanje autohtonih BMK u simuliranim uvjetima GIT. Većina autohtonih izolata BMK uspješno preživljava nepovoljne uvjete GIT in vitro, a osobito visok stupanj preživljavanja pri pH vrijednosti simuliranog želučanog soka 2 pokazali su izolati: ZG 1-54, ZG 2-25, ZG 3-17 i ZG 3-18. Analizom površinskih proteina autohtonih BMK pomoću SDS-PAGE utvrđeno je da soj BGGO 7-28 posjeduje S-layer protein koji može imati važnu ulogu u probiotičkim svojstvima ovog soja.

Sažetak (engleski)

Selected autochthonous lactic acid bacteria (LAB) were characterized by conventional microbiological methods as gram-positive, catalase-negative, asporogenous cocci or rods, which are successful in lowering the pH value of the medium and in syntheses of the high concentrations of lactic acid after overnight incubation either in GM17 or MRS growth media. 20 different bacterial strains were ultimately selected for examination of their probiotic properties. Selected strains were identified by sequencing the 16S rRNA gene and the sequencing results confirmed that these LAB are representatives of the different LAB strains, belonging to Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Streptococcus and Enterococcus genera. Autochthonous isolates were examined to determine their susceptibility to default antibiotics in order to rule out the possible spreading of antibiotic resistance. Sixteen isolates are susceptible to the majority of tested antibiotics, while streptomycin was shown as not active against majority of the LAB, which is probably related to the inactivation of the streptomycin molecule in an acidic environment, caused by the presence of high concentration of lactic acid, primary metabolite of LAB. Survival rate of autochthonous isolates, when exposed to GIT in vitro, was also tested. Isolates ZG 1-54, ZG 2-25, ZG 3-17 and ZG 3-18 showed high survival rates when exposed to the GIT in vitro (pH value of the simulated gastric juice was set to 2). The analysis of the surface cell proteins of the autochthonous LAB by SDS-PAGE revealed the presence of the S-layer protein in BGGO7-28. This protein could be of importance in the probiotic properties of this particular strain.

• Ključne riječi: bakterije mliječne kiseline; identifikacija sekvencioniranjem 16S rRNA gena; probiotičke starter kulture; svježi sir
• Ključne riječi (engleski): lactic acid bacteria; identification by sequencing 16S rRNA gene; probiotic starter cultures; fresh cheese
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:159:740972
• Studijski program: Naziv: Biotehnologija; smjerovi: Biokemijsko-mikrobiološki; Smjer: Biokemijsko-mikrobiološki; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: dodiplomski; Akademski / stručni naziv: diplomirani inženjer biotehnologije; smjer biokemijsko-mikrobiološki (dipl. ing. bioteh.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Pristup korisnicima matične ustanove
• Datum i vrijeme pohrane: 2017-05-31 08:03:21