Izolacija plazmida pBAD-HheC, pUC-GW-RadH i pUC-GW-NoxV iz velikog volumena kulture bakterije Escherichia coli

završni rad

• Naslov (engleski): Isolation of plasmids pBAD-HheC, pUC-GW-RadH and pUC-GW-NoxV from a large volume of Escherichia coli culture
• Autor: Emma Karolina Vasung
• Mentor: Marina Svetec Miklenić (mentor)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prehrambeno-biotehnološki fakultet; (Zavod za biokemijsko inženjerstvo); (Laboratorij za biologiju i genetiku mikroorganizama); Zagreb
• Datum i država obrane: 2022-09-16, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOTEHNIČKE ZNANOSTI; Biotehnologija

Sažetak

Plazmidi su iznimno važni u genetičkom inženjerstvu, gdje se upotrebljavaju kao vektori, tj. molekule DNA koje omogućuju umnožavanje kloniranog fragmenta DNA u stanici domaćinu. U genetičkom inženjerstvu E. coli se koristi kao univerzalan domaćin za kloniranje. Cilj ovog rada bio je izolirati plazmide pBAD-HheC, pUC-GW-RadH i pUC-GW-NoxV iz velikog volumena bakterije Escherichia coli. Nakon izolacije i pročišćavanja plazmidne DNA, provedena je gel-elektroforeza radi provjere uspješnosti izolacije. Stvarna struktura izoliranih plazmida provjerena je restrikcijskom analizom pomoću dva restrikcijska enzima. Veličina dobivenih fragmenata nakon cijepanja bila je u skladu s restrikcijskim mapama plazmida.

Sažetak (engleski)

Plasmids play an important role in genetic engineering; they are used as vectors, i.e., DNA molecules which allow the cloned DNA fragment to be propagated in the host cell. In genetic engineering, E. coli is used as a universal host for cloning. The aim of this work was to isolate the plasmids pBAD-HheC, pUC-GW-RadH and pUC-GW-NoxV from a large volume of E. coli culture. Following the isolation and purification of the plasmid DNA, gel-electrophoresis was used to determine whether the DNA isolation was successful. The actual structure of the isolated plasmids was confirmed using restriction enzyme analysis. The size of the cleaved fragments matched the restriction maps of the plasmids.

• Ključne riječi: Escherichia coli; plazmid; izolacija; ekspresijski vektor
• Ključne riječi (engleski): Escherichia coli; plasmid; isolation; expression vector
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:159:045114
• Studijski program: Naziv: Biotehnologija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: preddiplomski; Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica (baccalaureus/baccalaurea) inženjer/inženjerka biotehnologije (univ. bacc. ing. biotechn)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2024-04-09 12:42:41