Evaluation of downstream methods for monoclonal antibodies produced from CHO cell lines

diplomski rad

• Naslov (hrvatski): Evaluacija metoda za pročišćavanje monoklonalnih protutijela proizvedenih iz CHO stanične linije
• Autor: Jakov Cvetković
• Mentor: Igor Slivac (mentor)
• Član povjerenstva: Mirela Ivančić Šantek (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Višnja Gaurina Srček (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prehrambeno-biotehnološki fakultet; (Zavod za biokemijsko inženjerstvo); (Laboratorij za tehnologiju i primjenu stanica i biotransformacije); Zagreb
• Datum i država obrane: 2023-04-04, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOTEHNIČKE ZNANOSTI; Biotehnologija

Sažetak

CHO culture is a well-charaterized cell line that has been used for years in the field of biomanufacturing to produce various valuable pharmaceutical components, such as monoclonal antibodies that are used for the treatment of numerous diseases. Novel, more cost-effective downstream techniques and methods are continuously being developed by large companies. This thesis focused on the characterization of downstream equipment, mainly three components: depth filters (used for filtration), hollow fibers (used for concentration), and ion exchange membrane (used for anionic exchange, or AEX). For the specific process of trastuzumab purification, ErtelAlsop B4E7 filters were proven to be effective in the DNA removal step. In the critical flux experiment, the Microza hollow fibers (0.2 μm pores) could sustain the highest transmembrane flux before significant fouling occurred. Lastly, AEX was effective in removing host cell proteins/DNA.

Sažetak (hrvatski)

CHO stanice dobro su definirana kultura koje se koriste u proizvodnji mnogih farmaceutskih komponenata, poput monoklonalnih protutijela koja se koriste za prevenciju mnogih bolesti. U svrhu smanjenja troškova, mnoga velika poduzeća kontinuirano razvijaju nove metode pročišćavanja ovih vrijednih spojeva. Tijekom ovog rada ispitana je oprema za pročišćavanje, uz naglasak na tri glavna tipa: dubinski filteri (korišteni za filtraciju), membrane (korištene za koncentraciju) i membranski adsorberi (korištene za anionsku izmjenu). Za specifičan proces pročišćavanja Trastuzumab antitijela, ErtelAlsop B4E7 filteri su dokazano efektivni. Nadalje, ispitivane Microza membrane (pore veličina 0.2 μm) su izdržale najveći protok bez pojave začepljenja. Na kraju, anionska izmjena pokazala se najefektivnijom pri uklanjanju neželjenih staničnih proteina i DNK.

• Ključne riječi: monoclonal antibodies; downstream processing; filters; hollow fibers; ion exchange
• Ključne riječi (hrvatski): monoklonalna protutijela; procesi izdvajanja; filteri; membrane; ionska izmjena
• Jezik: engleski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:159:264444
• Studijski program: Naziv: Bioprocesno inženjerstvo; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra inženjer/inženjerka bioprocesnog inženjerstva (mag. ing. bioproc.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2024-05-21 13:30:50