Pages

Konstrukcija i ekspresija mutiranih inačica gena SCW4 kvasca Saccharomyces cerevisiae
Konstrukcija i ekspresija mutiranih inačica gena SCW4 kvasca Saccharomyces cerevisiae
Anja Damjanović
Protein Scw4 veže se kovalentno i nekovalentno na staničnu stjenku kvasca Saccharomyces cerevisiae, no nije poznato na koji se način kovalentno veže. U potrazi za regijom potencijalno odgovornom za vezanje napravljena je delecijska analiza gena SCW4. Mutacije u konstruktima uvodene su PCR metodom megapočetnice koristeći plazmid pBG1805 SCW4 kao DNA kalup. U ovom radu napravljena su i ispitana dva delecijska konstrukta, Δ202SCW4 i Δ231SCW4, u kojima su deletirani dijelovi gena koji...
Konstrukcija i mjerenje aktivnosti rekombinantnog proteina Pir2bla_CJ izloženog na površini stanične stijenke
Konstrukcija i mjerenje aktivnosti rekombinantnog proteina Pir2bla_CJ izloženog na površini stanične stijenke
Dominik Matijević
Jedna od alternativa klasičnim, unutarstaničnim, bioprocesima su izvanstanični bioprocesi temeljeni na sojevima kvasca koji izlažu biotehnološki zanimljive enzime na svojoj staničnoj površini. Takvo vezivanje proteina može se, na primjer, postići fuzijom enzima od interesa s proteinom Pir2. Međutim, nije poznato gdje je unutar proteina Pir2 najbolje umetnuti enzim, a da se što bolje sačuva i sposobnost vezanja proteina Pir2 i aktivnost izloženog enzima. U ovom radu konstruiran...
Konstrukcija i mjerenje aktivnosti rekombinantnog proteina Pir2bla_O izloženog na površini stanične stijenke
Konstrukcija i mjerenje aktivnosti rekombinantnog proteina Pir2bla_O izloženog na površini stanične stijenke
Stefani Prekpalaj
Stanice kvasca Saccharomyces cerevisiae mogu proteine koje izlučuju vezati na svoju staničnu stijenku. Pritom nativni proteini kvasca S. cerevisiae često sadrže nestrukturiranu spojnicu, tj. dio polipeptidnog lanca koji se ne smata u unaprijed predodređenu konformaciju. Cilj ovog rada bio je ispitati kako na efikasnost izlaganja na staničnu stijenku proteina izvjestitelja Pir2bla_L utječe njegova nestrukturirana spojnica. U tu svrhu je iz plazmida pRSⅠⅠ423-pir2bla_L uklonjen dio...
Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta
Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta
Antea Melvan
Cilj ovog rada bio je delecija gena YKU70 u kvascu Saccharomyces cerevisiae soja FF OPO8. Delecija je postignuta korištenjem delecijske kazete YKU70KanMX4 koja ima krajeve homologne DNA regijama koje se nalaze uzvodno i nizvodno od gena YKU70 u genomu kvasca, što omogućava njenu integraciju u ciljno mjesto putem mehanizma ends-out homologne rekombinacije. Također, delecijska kazeta sadrži i selektivni marker KanMX4 koji je omogućio selekciju transformanata uzgojem na podlozi koja...
Konstrukcija i određivanje osjetljivosti hibridnih sojeva kvasca Saccharomyces cerevisiae na inhibitore rasta
Konstrukcija i određivanje osjetljivosti hibridnih sojeva kvasca Saccharomyces cerevisiae na inhibitore rasta
Andrea Pranklin
U ovom radu korištena su dva haploidna soja kvasca Saccharomyces cerevisiae: soj YIIc17_E5 koji dobro podnosi visoke koncentracije etanola, izoliran iz vina i soj UWOPS87-2421 koji može rasti u prisutnosti nekih inhibitora rasta, a izoliran je iz cvijeta kaktusa Opuntia megacantha. Njihovim križanjem konstruirani su homozigotni i heterozigotni (hibridni) diploidni sojevi u svrhu razvoja potencijalnih producenata bioetanola iz lignoceluloznih sirovina. Rast haploidnih i konstruiranih...
Konstrukcija i provjera plazmida pAB9-126S8
Konstrukcija i provjera plazmida pAB9-126S8
Fran Andrašec
Cilj ovog rada bio je tehnikama genetičkog inženjerstva konstruirati plazmid pAB9-126S8 koji sadrži dva obrnuta ponavljanja od kojih je svako dugo 63 pb s razmaknicom od 8 pb. Plazmid je konstruiran modifikacijom plazmida pAB9-114 koji sadrži obrnuta ponavljanja duljine 57 pb bez razmaknice (palindrom). Palindrom je modificiran na način da je u njegov centar umetnut fragment čime su ruke palindroma produžene s 57 na 63 pb te je uvedena razmaknica. Nakon transformacije bakterije...
Konstrukcija mutanta SLX4 kvasca Saccharomyces cerevisiae
Konstrukcija mutanta SLX4 kvasca Saccharomyces cerevisiae
Renata Buđa
Palindromske sekvencije prisutne su u genetičkom materijalu svih živih organizama te su vrlo često uključene u regulaciju fundamentalnih staničnih procesa. Međutim, dulji palindromi mogu u DNA formirati rekombinogene sekundarne strukture koje mogu uzrokovati pucanje kromosoma, genetičke prerasporede i genetičke bolesti kod ljudi. Dosadašnji rezultati sugeriraju da bi za nastanak loma u palindromu u uvjetima in vivo mogao biti odgovoran gen SLX4. Upravo zbog toga je cilj ovoga rada...
Konstrukcija plazmida koji omogućuje pojačanu ekspresiju konstitutivno aktivnog alela YAP1C620F
Konstrukcija plazmida koji omogućuje pojačanu ekspresiju konstitutivno aktivnog alela YAP1C620F
Lada Ćurković
Zbog složene kemijske strukture, kvasac ne može fermentirati lignocelulozne sirovine te ih je potrebno hidrolizirati, no pri hidrolizi se uz fermentabilne šećere oslobađaju i inhibitori rasta (slabe kiseline i derivati furana). Cilj ovog rada bio je uvesti točkastu mutaciju C620F u gen YAP1 čijom translacijom nastaje konstitutivno aktivan oblik transkripcijskog faktora Yap1 koji uzrokuje povećanu otpornost stanica kvasca na visoke koncentracije furfurala i hidroksimetilfurfurala....
Konstrukcija plazmida pBAD-NoxV
Konstrukcija plazmida pBAD-NoxV
Karla Šubar
Tehnologija rekombinantne DNA je skup molekularno - genetičkih metoda koje omogućuju uvođenje preciznih genetičkih promjena u živu stanicu ili organizam u svrhu konstrukcije rekombinantnih molekula DNA. Primjena ove tehnologije u biologiji i srodnim znanostima rezultirala je mnogim revolucionarnim otkrićima. U ovom radu spomenutim metodama konstruiran je plazmid pBAD – NoxV. Plazmid je konstruiran ugradnjom fragmenta (inserta) DNA izdvojenog iz plazmida pUC – GW – NoxV, koji...
Konstrukcija plazmida pBAD-RadH
Konstrukcija plazmida pBAD-RadH
Franciska Rohlik
Escherichia coli jedan je od najpoznatijih i najvažnijih modelnih mikroorganizama. Zbog dobrog poznavanja genetike i biologije ove bakterije, njezinog kratkog generacijskog vremena te jednostavnih uvjeta uzgoja, koristi se kao domaćin za biotehnološku proizvodnju raznih kemikalija. Razvoj velikog broj tehnika genetičkog inženjerstva bio je usmjeren upravo na ovu korisnu bakteriju, te se stoga danas njezinim genomom može relativno lako manipulirati. Cilj ovog rada je konstruirati...
Konstrukcija plazmida pDUK
Konstrukcija plazmida pDUK
Tena Stipetić
Tehnologija rekombinantne DNA obuhvaća skup metoda koje omogućuju konstrukciju rekombinantnih molekula DNA. Primjena ove tehnologije rezultirala je revolucionarnim otkrićima u biologiji i srodnim znanostima. U ovom radu spomenutim metodama konstruirana su dva nova rekombinantna plazmida, pDUK i pDUK2, ugradnjom fragmenta DNA koji sadrži gen kanMX4 iz plazmida pDMS+ u plazmid pDU. Rezultati restrikcijskih analiza potvrdili su uspješnu konstrukciju oba plazmida. Konstruirani plazmidi...
Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris
Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris
Josip Rešetar
Pichia pastoris često je korišteni mikroorganizam u biotehnološkoj proizvodnji heterolognih proteina. Zbog mogućnosti rasta do visokih staničnih gustoća važna je mogućnost njegove primjene u dobivanju kemikalija na ekološki prihvatljiv i ekonomski isplativ način. U ovom radu konstruiran je plazmidni vektor pogodan za transformaciju kvasca Pichia pastoris koji nosi gen za rekombinantni protein Ccw12XR iz kvasca Saccharomyces cerevisiae. Rekombinantni gen se sastoji od dijela koji...

Pages